Polymeraskedjereaktion (PCR) ?r en h?gprecisionsmetod inom omr?det f?r att diagnostisera ?rftliga patologier, infektioner, virussjukdomar i alla skeden (akuta eller kroniska), s?v?l som - i ett tidigt skede - f?re uppenbara manifestationer av sjukdomen genom att identifiera patogener baserat p? deras DNA, RNA , som ?r genetiskt material, i prover som erh?lls fr?n patienten. Och idag kommer vi att prata om k?rnan, diagnostiska stadier och principer f?r polymeraskedjereaktion (PCR) metoder, s?v?l som dess kostnad.

Vad ?r polymeraskedjereaktion

Grunden f?r analysen ?r amplifiering (f?rdubbling) - skapandet av m?nga kopior fr?n en kort del av DNA (deoxiribonukleinsyra), som representerar det m?nskliga genetiska komplexet. Studien kr?ver en mycket liten m?ngd fysiologiska substanser (sputum, avf?ring, skrapningar av epitelet, prostatajuice, blod, sperma, fostervatten, slem, placentav?vnad, urin, saliv, pleurav?tska, cerebrospinalv?tska). I det h?r fallet kan till exempel till och med en enda skadlig mikrob uppt?ckas i en patients urogenitalkanal.

PCR-tekniken (polymeraskedjereaktion) utvecklades av den amerikanske vetenskapsmannen K. Mullis, som fick Nobelpriset 1993.

Anv?nds aktivt:

• vid tidig diagnos av infektioner, genetiska;
• vid r?ttsmedicinsk unders?kning i n?rvaro av en extremt liten m?ngd DNA f?r forskning;
• inom veterin?rmedicin, l?kemedel, biologi, molekyl?r genetik;
• f?r identifiering av en person genom DNA, bekr?ftelse av faderskap;
• i paleontologi, antropologi, ekologi (vid sp?rning av produkters kvalitet, milj?faktorer).

Den h?r videon kommer att ber?tta vad en polymeraskedjereaktion ?r:

Vem ?r det tilldelat

Polymeraskedjereaktion vid diagnos av infektionssjukdomar ?r en av de mest p?litliga metoderna f?r h?g noggrannhet och tillf?rlitlighet. Till exempel n?rmar sig tillf?rlitligheten f?r PCR-analysen f?r klamydia och m?nga andra patogener 100 % (absolut). Oftast ordineras ptill patienter som vid diagnosen har sv?rt att identifiera en specifik patogen.

Laboratorie-PCR-test anv?nds:

• att uppt?cka patogener som orsakar infektion i urin- och k?nsorganen, vilka ?r sv?ra att identifiera med hj?lp av gr?dor eller immunologiska metoder;
• f?r omdiagnostik av HIV i det inledande skedet i fallet med ett positivt, men tveksamt resultat av den initiala analysen (till exempel hos nyf?dda fr?n f?r?ldrar infekterade med AIDS);
• att etablera en onkologisk sjukdom i ett tidigt skede (studie av onkogenmutationer) och individuell korrigering av behandlingsregimen f?r en viss patient;
• f?r tidig uppt?ckt och potentiell behandling av ?rftliga patologier.

S? framtida f?r?ldrar testas f?r att ta reda p? om de ?r b?rare av en genetisk patologi; hos barn best?mmer PCR sannolikheten f?r exponering f?r en ?rftlig sjukdom.

• f?r att uppt?cka fosterpatologier i ett tidigt skede av graviditeten (individuella celler av ett v?xande embryo unders?ks f?r m?jliga mutationer);
• hos patienter f?re organtransplantation - f?r "v?vnadstypning" (best?mma v?vnadskompatibilitet);
• att uppt?cka farliga patogena organismer i donerat blod;
• hos nyf?dda barn - f?r att uppt?cka latenta infektioner;
• att utv?rdera resultaten av antiviral och antimikrobiell behandling.

Varf?r g? igenom denna procedur?

Eftersom PCR ?r en mycket effektiv diagnostisk metod som ger ett n?stan 100% resultat, anv?nds proceduren:

• f?r att bekr?fta eller utesluta den slutliga diagnosen;
• snabb bed?mning av behandlingens effektivitet.

I m?nga fall ?r PCR det enda m?jliga testet f?r att uppt?cka en utvecklande sjukdom om andra bakteriologiska, immunologiska och virologiska diagnostiska metoder ?r v?rdel?sa.

• Virus uppt?cks med PCR direkt efter infektion och innan tecken p? sjukdom upptr?der. Tidig uppt?ckt av viruset m?jligg?r snabb behandling.
• Den s? kallade "virala belastningen" (eller antalet virus i kroppen) best?ms ocks? genom kvantitativ DNA-analys.
• Specifika patogener (som Kochs tuberkelbacill) ?r sv?ra och tar f?r l?ng tid att odla. PCR-analys g?r att du snabbt kan identifiera det minsta antalet patogener (levande och d?da) i prover som ?r l?mpliga f?r forskning.

Detaljerad patogen DNA-analys anv?nds:

• f?r att best?mma dess k?nslighet f?r specifika typer av antibiotika, vilket g?r att du omedelbart kan b?rja behandlingen;
• att kontrollera spridningen av epidemier bland tama, vilda djur;
• att identifiera och ?vervaka nya smittsamma mikrobiella arter och patogensubtyper som har underbl?st tidigare epidemier.

Typer av diagnostik

Standardmetod

Analys av polymeraskedjereaktionen utf?rs p? basis av multipel amplifiering (f?rdubbling) av ett specifikt DNA- och RNA-fragment med anv?ndning av speciella primer-enzymer. Som ett resultat av kopieringskedjan erh?lls en m?ngd material som ?r tillr?cklig f?r forskning.

Under proceduren kopieras endast det ?nskade fragmentet (motsvarande de specificerade specifika f?rh?llandena) ?ven om det faktiskt finns i provet.

Denna detaljerade video med anv?ndbara diagram ber?ttar hur PCR fungerar:

Andra metoder

• PCR i realtid. I denna typ av studier startar processen att identifiera ett givet DNA-fragment efter varje cykel, och inte efter att hela kedjan p? 30-40 cykler har avslutats. Denna typ av studie l?ter dig f? information om m?ngden av en patogen (virus eller mikrob) i kroppen, det vill s?ga att utf?ra en kvantitativ analys.
• RT-PCR (omv?nt transkriptionsl?ge). Denna analys anv?nds f?r att hitta enkelstr?ngat RNA f?r att detektera virus vars genetiska bas ?r RNA (till exempel hepatit C-virus, immunbristvirus). I en s?dan studie anv?nds ett speciellt enzym - omv?nt transkriptas och en viss primer, och enkelstr?ngat DNA byggs p? basis av RNA. Sedan ?terst?lls en andra DNA-str?ng fr?n denna str?ng och standardproceduren utf?rs.

Indikationer f?r att h?lla

PCR-f?rfarandet anv?nds i kliniken f?r infektionssjukdomar, neonatologi, obstetrik, pediatrik, urologi, gynekologi, venerologi, neurologi, nefrologi, oftalmologi.

Indikationer f?r analysens syfte:

• klarg?rande av risken f?r att utveckla genetiska abnormiteter hos ett barn med sannolikheten f?r ?rftliga patologier;
• diagnostisera b?da f?r?ldrarna n?r man planerar en graviditet eller ett allvarligt tillst?nd hos modern under en p?g?ende graviditet;
• sv?righeter med befruktning, identifiering av orsakerna till infertilitet;
• misstanke om sexuella infektioner i det akuta skedet och med symtom p? deras ?verg?ng till kronisk;
• uppt?ckt av orsaker till inflammatoriska processer av oklart ursprung;
• oskyddade tillf?lliga och konstanta sexuella kontakter;
• best?mning av k?nsligheten hos en patogen mikroorganism f?r specifika antibiotika;
• patienter med misst?nkt latent infektion f?r att uppt?cka patogener innan uppenbara symtom utvecklas (preklinisk diagnos);
• patienter f?r att bekr?fta ?terh?mtning efter sjukdom (retrospektiv diagnos);

Diagnostik anv?nds ocks? om det ?r n?dv?ndigt att exakt identifiera f?ljande patogener:

• hepatitvirus (ABC G), human immunbrist, cytomegalovirus;
• vibriokolera;
• herpes simplex-virus, herpetiforma arter;
• retro - adeno - och rhinovirus;
• r?da hundvirus, Epstein-Barr, varicella (Zoster - virus);
• parvo- och picornavirus;
• bakterie Helicobacter pylori;
• legionella, patogena typer av Escherichia coli;
• Staphylococcus aureus;
• patogen;
• Clostridia, difteri och Haemophilus influenzae;

Det anv?nds ocks? f?r att fastst?lla infektioner:

• K?rtelfeber;
• borrelios, listerios, f?stingburen encefalit;
• candidiasis orsakad av Candida-svampar;
• sexuella infektioner - trichomoniasis, ureaplasmos, blekt treponema, gardnerellos, gonorr?, mykoplasmos, klamydia;
• tuberkulos.

Kontraindikationer f?r att h?lla

Eftersom proceduren inte utf?rs med patienten, utan n?gon effekt p? kroppen, utan med biologiskt material som tas f?r forskning, finns det inga kontraindikationer f?r PCR p? grund av fr?nvaron av potentiell fara.

Biomaterialprovtagning fr?n livmoderns livmoderhalskanal utf?rs dock inte efter kolposkopi. Leverans av utstryk, skrapning f?r analys ?r till?ten endast 4 till 6 dagar efter slutet av menstruationen och fullst?ndigt upph?rande av utsl?pp.

?r metoden s?ker

Ingen negativ p?verkan p? patienten i en isolerad studie av hans biomaterial i laboratoriet ?r m?jlig.

F?rberedelse f?r proceduren (leverans av biologiska ?mnen f?r analys)

Som ett prov f?r PCR-analys, d?r DNA fr?n en fr?mmande patogen detekteras, anv?nds alla biologiska v?tskor, v?vnader, kroppssekret. Provtagningen av test?mnet utf?rs i form av att ta blod fr?n en ven, skrapning fr?n struphuvudet, n?sh?lan, urinr?ret, pleurah?lan, livmoderhalsen.

F?re det diagnostiska f?rfarandet f?rklarar l?karen f?r patienten vilket material som kommer att tas:

1. Vid unders?kning av sexuella infektioner tas sekret fr?n k?nsorganen, urin och ett utstryk fr?n urinr?ret.
2. N?r man analyserar f?r herpetiska infektioner, cytomegalovirus, mononukleos - tar de urin, en svalgpinne f?r analys, f?r hepatit, toxoplasmos - blod fr?n en ven.
3. F?r att diagnostisera olika typer tas cerebrospinalv?tska.
4. Inom pulmonologi ?r prover f?r analys sputum och pleurav?tska.
5. N?r man g?r en studie av m?jliga intrauterina infektioner under graviditeten anv?nds fostervatten och placentaceller f?r analys.

Analysens tillf?rlitlighet och noggrannhet beror p? steriliteten hos f?rh?llandena n?r materialet tas. Eftersom PCR-testet ?r mycket k?nsligt kan varje kontaminering av test?mnet f?rvr?nga resultatet.

Kompetent f?rberedelse f?r leverans av biomaterial inneb?r inga sv?righeter f?r patienterna. Det finns vissa rekommendationer:

• vid analys av sexuella infektioner:
  • utesluta intima kontakter 72 timmar f?re leverans av materialet;
  • sluta anv?nda n?gra vaginala produkter i 3 dagar;
  • sedan kv?llen f?reg?ende dag, utf?r inte hygienen i omr?det som studeras;
  • utesluta urinering i 3-4 timmar n?r du tar ett prov fr?n urinr?ret;
• sluta ta antibiotika en m?nad innan du testar f?r infektioner;
• donera blod p? morgonen innan du ?ter och dricker;
• Uppsamlingen av den f?rsta morgonportionen av urin utf?rs i en steril beh?llare efter en noggrann intim toalett.

L?s mer om hur diagnostik g?r till med polymeraskedjereaktionsmetoden.

Hur ?r proceduren

N?r man utf?r en PCR-studie om och om igen i reaktorn (f?rst?rkare eller termisk cykler), upprepas vissa cykler:

1. Det f?rsta steget ?r denaturering. Saliv, blod, biopsi, gynekologiska prover, sputum, d?r man misst?nker f?rekomst av DNA (eller RNA) fr?n patogenen, placeras i en f?rst?rkare, d?r materialet v?rms upp och DNA:t delas upp i tv? separata kedjor.
2. Det andra steget ?r gl?dgning eller l?tt kylning av materialet. och l?gga till primers till den som kan k?nna igen de ?nskade sektionerna i DNA-molekylen och binda till dem.
3. Det tredje steget ?r f?rl?ngning- intr?ffar efter tillsats av 2 primers till var och en av DNA-str?ngarna. Under processen fullbordas patogenens DNA-fragment och dess kopia bildas.

Dessa cykler upprepas som en "kedjereaktion", vilket varje g?ng leder till en f?rdubbling av kopior av ett specifikt DNA-fragment (till exempel ett segment d?r ett visst virus ?r programmerat). P? n?gra timmar bildas m?nga kopior av DNA-fragmentet och deras n?rvaro i provet detekteras. D?refter analyseras resultaten och j?mf?rs med databasen ?ver olika typer av patogener f?r att fastst?lla typen av infektion.

L?s om tolkningen av resultaten och slutsatsen utifr?n PCR-reaktionen nedan.

Dechiffrera resultaten

Det slutliga resultatet av studien utf?rdas 1-2 dagar efter leverans av biologiskt material. Ofta - redan f?rsta dagen efter analysen.

Kvalitativ analys

• Negativ resultatet inneb?r att inga sp?r av smitt?mnen hittades i ?mnet som l?mnats in f?r forskning.
• Positiv ett resultat inneb?r uppt?ckt av patogena virus eller bakterier i ett biologiskt prov med en mycket h?g grad av noggrannhet vid tidpunkten f?r inl?mning.

Om resultatet ?r positivt, men det inte finns n?gra tecken p? aktivering av infektionen, kallas detta tillst?nd av kroppen asymtomatisk "h?lsosam transport". Oftast observeras n?r man tar biomaterial fr?n en viss plats (cervikal kanal, urinr?r, munh?la) vid virussjukdomar. Behandling i detta fall kr?vs inte, men konstant medicinsk ?vervakning ?r n?dv?ndig, eftersom det finns en m?jlighet:

• spridning av viruset fr?n b?rare och infektion av friska m?nniskor;
• aktivering av processen och ?verg?ngen av sjukdomen till en kronisk form.

Men om blodprovet ?r positivt indikerar detta att infektionen har p?verkat kroppen, och detta ?r inte l?ngre ett b?rartillst?nd, utan en patologi som kr?ver omedelbar specifik terapi.

Kvantitativ analys

Det kvantitativa resultatet best?ms av specialisten specifikt f?r en viss typ av infektion. P? grundval av det ?r det m?jligt att bed?ma graden av utveckling, sjukdomsstadiet, vilket g?r det m?jligt att snabbt ordinera r?tt behandling.

genomsnittlig kostnad

Priserna f?r att genomf?ra en polymeraskedjereaktion best?ms av: typen av studie, komplexiteten f?r att identifiera patogenen, sv?righeten att samla in biologiskt material, typen av analys (kvalitativ eller kvantitativ), prisniv?n i laboratoriet.

? andra sidan, i studien av PCR kan flera patogener uppt?ckas samtidigt n?r man tar en typ av material f?r analys. Detta sparar p? andra laboratorietester.

Ungef?r kostnaden f?r PCR-analys i rubel:

• gonokocker, gardnerella, trichomonas vaginalis - fr?n 180
• chlamydia trachomatis - fr?n 190
• papillomvirus - fr?n 380 till 500
• biocenos av urogenitalkanalen hos kvinnor (kvantitativ och kvalitativ bed?mning av mikroflora) - fr?n 800.

F?r mer anv?ndbar information om PCR-studien, se videon nedan:

PCR (polymeraskedjereaktion) ?r en prestation inom molekyl?rbiologi, en av de viktigaste metoderna f?r klinisk laboratoriediagnostik i slutet av 1900-talet och b?rjan av 2000-talet, vilket ger stora f?rdelar inom olika medicinska vetenskapsomr?den.

S?ledes, ?ven om det bland de miljoner cellerna i m?nniskokroppen inte ?r det levande viruset i sig som g?r f?rlorat, utan bara en partikel av dess DNA, s? kommer PCR, om inget st?r det, f?rmodligen att klara av uppgiften och rapportera stanna kvar av "fr?mlingen" med ett positivt resultat. Detta ?r k?rnan i PCR och dess fr?msta f?rdel.

F?rdelar och nackdelar

Laboratoriet som utf?r PCR-diagnostik ?r f?rem?l f?r de h?gsta kraven vad g?ller utrustning, testsystem och medicinsk personals kvalifikationer. Detta ?r ett h?gteknologiskt laboratorium som har en arsenal av mycket k?nsliga och mycket specifika reagenser, s? det har inga speciella nackdelar. S?vida det inte ger ett positivt resultat i avsaknad av kliniska manifestationer, och d?rmed st?ller l?karen inf?r ett dilemma: ?r det v?rt att p?b?rja behandling eller inte?

L?karen som observerar patienten b?rjar tvivla p? tillf?rlitligheten av testresultaten, eftersom han inte ser n?gra tecken p? sjukdomen. Men ?nd?, med tanke p? PCR-systemets h?ga k?nslighet, b?r man komma ih?g att det uppt?cker patogenen ?ven i det prekliniska skedet, och ett positivt resultat i detta fall ?r mer en f?rdel ?n en nackdel. Utifr?n detta m?ste den behandlande l?karen sj?lv besluta om terapins l?mplighet, med h?nsyn till andra argument "f?r" och "emot".

F?rdelarna med diagnostik med polymeraskedjereaktion ?r uppenbara:

• H?g specificitet, som n?r 100 %, p? grund av n?rvaron i det valda provet av nukleinsyrapartiklar som ?r inneboende i en viss organism, men fr?mmande f?r m?nniskor;
• H?g prestanda, eftersom PCR ?r en h?gteknologisk automatiserad teknik som ger m?jlighet att utf?ra tester p? dagen f?r materialprovtagning och d?rmed befria patienten fr?n on?diga bekymmer;
• PCR, som arbetar p? ett enda prov, kan utf?ra flera studier och ungef?r uppt?cka flera patogener om hon har en s?dan uppgift. Till exempel, vid diagnostisering av en klamydiainfektion, d?r PCR ?r en av huvudmetoderna, tillsammans med klamydia, kan ocks? Neisseria (gonokocker) uppt?ckas - patogenen. Dessutom p?verkar detta inte resultatens tillf?rlitlighet negativt;
• PCR-testning visar farliga mikroorganismer under inkubationstiden, n?r de ?nnu inte har haft tid att orsaka p?taglig skada p? kroppen, det vill s?ga tidig diagnos varnar f?r den f?rest?ende utvecklingen av den patologiska processen, vilket g?r det m?jligt att f?rbereda sig f?r det och ta det fullt bev?pnat.

Dessutom, f?r att undvika missf?rst?nd som ibland uppst?r under diagnostik, skyddar PCR sig ocks? genom att dess resultat kan registreras (foto, dator) f?r att vid behov kunna anv?nda dem f?r expert?ndam?l.

Normen i PCR-svar anses vara ett negativt resultat., vilket indikerar fr?nvaron av fragment av fr?mmande nukleinsyror, ett positivt svar kommer att indikera n?rvaron av en infektion i kroppen, digitala v?rden indikerar tillst?ndet f?r viruset och dess koncentration vid testtillf?llet. En fullst?ndig utskrift av analysen utf?rs dock av en l?kare som har genomg?tt specialutbildning i ?mnet "PCR". Att f?rs?ka tolka resultaten sj?lv ?r ingen mening, eftersom det ?r m?jligt, vilket sannolikt kommer att h?nda, att missf?rst? och b?rja oroa sig i f?rv?g.

Vad ?r PCR "r?dd", vad kan det g?ra och hur man f?rbereder sig f?r det?

Som med alla andra studier, ibland ?r testresultaten falskt positiva eller falskt negativa d?r PCR inte ?r n?got undantag. Detta kan h?nda i f?ljande fall:

1. Brott mot den tekniska processen i ett av reaktionsstadierna;
2. Underl?tenhet att f?lja reglerna f?r insamling av material, dess lagring eller transport;
3. N?rvaron av fr?mmande f?roreningar i materialet.

Detta tyder p? att PCR - diagnosen av infektioner m?ste n?rma sig noggrant, noggrant och noggrant, annars kan materialproverna ?ndra sin strukturella struktur eller till och med kollapsa.

Stadier av PCR-diagnostik. Falska resultat kan ge kr?nkningar i vilket skede som helst av studien

PCR-diagnostik av infektioner tillh?r kategorin "guldstandarder" bland andra laboratoriemetoder, s? den kan anv?ndas f?r att s?ka efter patogener f?r m?nga sjukdomar som vid f?rsta anblicken inte har n?got gemensamt:

• Tuberkulos av olika lokalisering, lunginflammation (inklusive atypisk, orsakad av klamydia);
• Barndomsinfektioner (m?ssling r?da hund, parotit, m?ssling);
• Difteri;
• salmonellos;
• Zoonotisk infektionssjukdom - listerios (sjukdomen k?nnetecknas av en m?ngd olika symtom med skador p? lymfk?rtlarna, centrala nervsystemet, inre organ);
• Sjukdomar orsakade av penetration av Epstein-Barr-viruset (infekti?s mononukleos, etc.);
• Onkologisk patologi provocerad av papillomvirusinfektion (HPV och dess typer);
• Borrelios (Borrelios, f?stingburen encefalit);
• Helicobacter pylori-infektion, vars orsak ?r bakterien Helicobacter pylori som lever i m?nniskans mage. Det har bevisats att Helicobacter orsakar utveckling av mag- eller tolvfingertarmscancer;
• och praktiskt taget allt.

PCR-diagnostik av sexuellt ?verf?rbara infektioner ?r av s?rskild vikt, eftersom sjukdomar orsakade p? detta s?tt ofta p?g?r under l?ng tid utan n?gra kliniska manifestationer, men under graviditeten b?rjar de bli mer aktiva och d?rmed hotar barnets h?lsa och till och med livet. . Och bete sig likadant. Vissa av dem ("fackla") ?r samtidigt relaterade till sexuellt ?verf?rbara sjukdomar, s? de senare kr?ver mer detaljerad ?verv?gande. L?saren kommer att kunna bekanta sig med de mest popul?ra metoderna i f?ljande avsnitt av artikeln.

Hur f?rbereder man sig ordentligt f?r att f? ett tillf?rlitligt resultat?

Vi noterar genast att f?rberedelserna f?r PCR ?r ganska enkel och kr?ver inga speciella anstr?ngningar fr?n patientens sida. Du beh?ver bara utf?ra tre enkla uppgifter:

1. Ha inte samlag 24 timmar innan du tar testet;
2. F?r att ta och analysera blod fr?n en ven m?ste du komma p? fastande mage, f?rresten, du kan inte heller dricka;
3. Urin ska passera p? natten (p? morgonen - i en steril burk k?pt dagen innan p? ett apotek).

PCR kan fungera i vilken biologisk milj? som helst

PCR-metoden ?r inte "blodt?rstig", d?rf?r accepterar den alla biologiska milj?er som inneh?ller ett misst?nkt smitt?mne. valet - vad du beh?ver ta f?r forskning, kvarst?r hos l?karen.

S?ledes, p? jakt efter en patogen, f?rutom ett blodprov (?ven om det ocks? ?r l?mpligt och i de flesta fall tas parallellt med annat material), kan du anv?nda:

• (urladdning av urogenitala omr?det);
• Skrapning av slemhinnorna i munh?lan, konjunktiva, nasofarynx, k?nsorganen (hos kvinnor tas de fr?n livmoderhalsen och slidan, hos m?n - fr?n urinr?ret);
• saliv;
• s?desv?tska;
• prostatajuice;
• Placentav?vnader och fostervatten (fostervatten);
• Urinsediment (efter centrifugering), till exempel f?r att uppt?cka vissa STI och Mycobacterium tuberculosis;
• Sputum och pleurav?tska f?r samma ?ndam?l;
• exsudat;
• Cerebrospinalv?tska vid misst?nkt infekti?s lesion i centrala nervsystemet;
• Biopsimaterial (biopsi) taget fr?n levern, tolvfingertarmen, magen, etc.

Till ovanst?ende vill jag till?gga att det i alla fall, ?ven vid skrapningar och sekret, kommer att finnas tillr?ckligt med material f?r testning, eftersom PCR-testning inte kr?ver stora volymer r?cker det med n?gra mikroliter f?r analys, som vanligtvis tas in i en Eppendorf-typ mikror?r och skickas f?r att studera.

Sjukdomar och anv?ndning av PCR

HIV och polymeraskedjereaktionen

Vanligtvis, n?r man klarar en anonym unders?kning vid positiva resultat av immunblotting, upprepas diagnosen igen. Om diagnosen bekr?ftas, ordineras patienten ytterligare studier:

1. Att med hj?lp av immunologiska reaktioner best?mma de absoluta v?rdena av antalet CD 4-lymfocyter (immunkompetenta celler - T-hj?lpare eller hj?lpare), som infektionen infekterar i f?rsta hand, varefter de f?rlorar sina grundl?ggande egenskaper och inte kan skilja mellan " eget" och "utl?ndskt". De tar RNA fr?n viruset som cirkulerar i blodplasman f?r normala celler i kroppen och reagerar inte p? dem;
2. Detektion av viralt RNA genom PCR och ber?kning av koncentrationen av viruspartiklar f?r att fastst?lla stadiet, sv?righetsgraden av den patologiska processen och prognos baserat p? dessa data. Naturligtvis finns inte ordet "norm" i detta avseende, eftersom reaktionen alltid ?r positiv, och avkodningen av digitala v?rden ligger inom l?karens kompetens.

PCR och hepatit

PCR-metoden kan uppt?cka patogener, oftast anv?nds testet f?r att diagnostisera hepatit C, som uppt?cks d?ligt med andra metoder.

Hepatit C-viruset (inneh?llande RNA) i sitt beteende i m?nniskokroppen liknar HIV. Han kilar in i levercellers genom (hepatocyter) och stannar d?r och v?ntar i vingarna, vilket kan komma ?tminstone om 2 ?r, ?tminstone om 20 ?r, s? l?karna kallade honom "mild m?rdare". Hepatit C leder till bildandet av en malign process i leverparenkymet, vilket manifesterar sig i de senare stadierna. Immunsystemet m?rker inte alla dessa h?ndelser, eftersom viruset f?rv?xlas med en hepatocyt. Visserligen produceras antikroppar mot viruset i vissa m?ngder, men de ger inte ett anst?ndigt immunsvar. F?r att diagnostisera hepatit C ?r ELISA inte s?rskilt informativt, eftersom det indikerar att viruset har l?mnat sp?r och det ?r inte k?nt om det l?mnat sig sj?lvt. Med HCV ?r fall av sj?lvl?kning k?nda, medan antikroppar mot viruset finns kvar och forts?tter att cirkulera livet ut (immunologiskt minne). PCR ligger m?rkbart f?re bildningen av antikroppar och kan detektera en viruspartikel s? tidigt som 1-1,5 veckor, medan antikroppar kan upptr?da i intervallet fr?n 2 m?nader till sex m?nader

PCR-diagnostik vid misst?nkt skenande hepatit C-virus i m?nniskokroppen ?r den mest optimala forskningsmetoden, eftersom endast den kan k?nna igen n?rvaron av en "mild fiende" i patientens blod- eller leverbiopsi.

Men ibland finns det fall d? AT ?r positiva och PCR-resultatet ?r negativt. Detta h?nder ibland n?r m?ngden virus ?r mycket l?g eller n?r det ?r vilande i levern utan att komma in i blodomloppet. F?r att ?nd? hitta sanningen analyseras patienten p? nytt, eller till och med mer ?n en.

Papillomavirusinfektion

Om sj?lvl?kning inte intr?ffar kan den ocks?, utan att visa sig, kvarst? under l?ng tid i v?rdens kropp, som inte ens misst?nker det, eftersom PCR inte har gjorts, och det inte fanns n?gra symtom p? sjukdomen. F?rekomsten av papillomvirusinfektion, om ?n latent, ?r dock l?ngt ifr?n likgiltig f?r m?nniskors h?lsa, d?r vissa typer av virus som orsakar cancer (typ 16, 18) ?r av s?rskild fara.

Oftare lider den kvinnliga h?lften av befolkningen av HPV, eftersom viruset ?lskar det kvinnliga k?nsorganet mer, och s?rskilt livmoderhalsen, d?r vissa typer av virus bidrar till utvecklingen av dysplastiska processer, och sedan livmoderhalscancer, om dysplasi inte ?r det behandlas och viruset fris?tts. S? polymeraskedjereaktionen kommer att uppt?cka viralt DNA och sedan indikera den "d?liga" eller "bra" (onkogena eller icke-onkogena) typen som ?r bosatta i kvinnans kropp.

Andra STI och TORCH-infektioner

Uppenbarligen kan polymeraskedjereaktionen hitta vilken fr?mmande struktur som helst som best?r av nukleinsyror, s? detta test ?r l?mpligt f?r att detektera alla STDs och TORCH-infektioner, men det anv?nds inte alltid. Varf?r, s?g, genomf?ra s? dyr forskning f?r att uppt?cka eller gonokocker, om det finns billigare och billigare s?dana?

TORCH-infektioner och sexuellt ?verf?rbara sjukdomar ?r s? relaterade till varandra att det ibland ?r sv?rt att avg?ra vilken grupp en viss patogen ska h?nf?ras till. I allm?nhet kan det vara sv?rt att f?rst? dem, eftersom dessa ?r ganska olika grupper av mikroorganismer som alltid kan ?verf?ras sexuellt eller endast under vissa f?rh?llanden (immunbrist), och som kan vara av intresse endast under graviditeten, p? grund av den m?jliga negativa inverkan p? dess f?rlopp och p? fostret.

PCR ?r den huvudsakliga metoden f?r att uppt?cka latenta infektioner

Utvecklingen av kliniska manifestationer ?r baserad p? olika patogener, som endast kan hittas med PCR, vilket ?r dess huvuduppgift, ibland tillsammans med ELISA, och ibland som det enda bekr?ftande testet, s?rskilt om det inte finns n?gra symtom p? sjukdomen. En s?dan sv?r situation kan skapas av en polymikrobiell infektion, som f?rutom uppenbara patogener ?ven innefattar opportunistiska patogener.

Ureaplasma ses ofta i tandem med mykoplasma. Och detta ?r ingen tillf?llighet. Dessa arter, liksom klamydia, ?r varken virus eller bakterier, de lever inuti celler och tillh?r STI, ?ven om deras n?rvaro i en frisk kropp ocks? ?r l?ngt ifr?n ovanlig. S? f?r att skilja en frisk b?rare fr?n en sjuk person beh?vs speciella metoder, d?r PCR anses vara den mest tillf?rlitliga, eftersom andra studier ?r ineffektiva p? grund av s?rdragen i strukturen och beteendet hos dessa mikroorganismer.

N?r det g?ller (typ 1, 2) och, som ocks? tillh?r herpesvirus (typ 5), ?r situationen ?ven h?r tvetydig. Infektionsfrekvensen f?r v?rldens befolkning n?rmar sig 100%, d?rf?r ?r identifieringen av viruset och dess dos i det h?r fallet mycket viktigt, vilket ?r s?rskilt viktigt under graviditeten, f?r f?r en vuxen ?r viruset som har slagit rot i hans kroppen orsakar ofta inga problem och ger inga tecken p? sjukdom.

D?rf?r b?r en s?dan unders?kning som ordinerats av en l?kare inte ignoreras, eftersom polymeraskedjereaktionen i vissa fall ?r en obligatorisk och n?dv?ndig metod f?r laboratoriediagnostik som kan skydda inte bara en kvinna utan ocks? en liten, of?dd man fr?n allvarliga komplikationer.

Sammanfattningsvis skulle jag vilja notera att en s?dan underbar metod som PCR har tj?nat m?nskligheten i mer ?n 30 ?r. Samtidigt ?r testets uppgifter inte begr?nsade till s?kandet efter patogener av infektionssjukdomar. Polymeraskedjereaktionen, f?dd p? molekyl?rbiologins jord, ?r ouppl?sligt kopplad till genetik, den framg?ngsrikt anv?nt i kriminalteknik f?r personlig identifiering, inom r?ttsmedicin f?r att fastst?lla faderskap, inom veterin?rmedicin, om djurkliniken har m?jlighet att k?pa dyrbar utrustning, samt inom andra omr?den (industri, jordbruk etc.).

Video: PCR - essens och till?mpning

PCR-analys, inte m?nga vet vad det ?r, ?ven om det idag ?r en av de innovativa metoderna f?r att diagnostisera infektionssjukdomar, f?r vilken dess utvecklare fick Nobelpriset 1993. Denna h?gteknologiska metod l?ter dig uppt?cka allvarliga sjukdomar i ett tidigt skede och p?b?rja behandlingen i tid.

Analysen bygger p? molekyl?rbiologins principer. En PCR-studie best?r i att anv?nda ett speciellt enzym som, under p?verkan av temperaturf?rh?llanden, kopierar RNA och DNA fr?n bakterier och virus som finns i det insamlade biomaterialet. S?dan massreproduktion g?r det m?jligt f?r l?karen att avg?ra exakt vilken art bakterien som provocerade sjukdomen tillh?r, samt att m?ta niv?n p? dess koncentration i biomaterialet. Kopieringsproceduren utf?rs i en speciell apparat - en f?rst?rkare, som v?rmer och kyler provr?ren med det insamlade materialet, vilket skapar bekv?ma f?rh?llanden f?r replikering.

PCR-forskning utf?rs av m?nga sk?l, men oftast anv?nds den f?r att fastst?lla f?rekomsten av infektionssjukdomar som:

• herpes;
• genitala infektioner - klamydia, ureaplasmos, bakteriell vaginos, trichomoniasis;
• candidiasis;
• hepatit;
• mononukleos;
• listerios;
• cytomegalovirus;
• tuberkulos;
• m?nskligt papillomvirus;
• f?stingburen encefalit.

PCR-analys ?r inte begr?nsad till omfattningen inom medicin, screening g?rs ofta om det ?r n?dv?ndigt att f?rst? vem som ?ger det biologiska material som finns p? brottsplatsen, det vill s?ga PCR-analys anv?nds flitigt inom kriminalteknik. Det b?r noteras att ett utstryk eller blod f?r PCR tas om faderskap kr?vs. Resultaten av PCR-diagnostik ?r inte p? n?got s?tt s?mre ?n den vanliga analysen f?r DNA-sl?ktskap, och det ?r mycket billigare.

Funktioner av diagnostik

PCR-analys har ett stort antal positiva aspekter. F?rst och fr?mst ?r det viktigt att notera testets k?nslighet. PCR-analysatorn kan best?mma bakteriers DNA-molekyler ?ven om de ?r sm? till antalet, det vill s?ga att l?karen f?r information om det tidiga stadiet av sjukdomen eller uppkomsten av den kroniska formen av sjukdomen. Ett PCR-blodprov kan till och med fastst?lla f?rekomsten av en infektionssjukdom, som ?r i latent form och inte ger sig sj?lv.

Det b?r noteras att PCR-analys hos m?n och kvinnor kan utf?ras i n?rvaro av alla typer av material, det beh?ver inte vara blod eller ett utstryk, saliv, hudceller och till och med urin kommer att g?ra.

Resultaten av PCR-analyser kan vara omfattande, eftersom PCR-diagnostik av infektioner kan f?nga flera patogener samtidigt, som finns i ett biomaterialprov. Unders?kningen kan g?ras n?r som helst, vilket analysen visar att en person kan ta reda p? p? kort tid, eftersom resultaten av diagnosen av biomaterialet ?r klara p? 5 timmar.

Alla l?kare ?r ?verens om att ett blodprov f?r PCR eller annat material aldrig ger falska resultat om diagnosmetoden f?ljs korrekt. PCR-positiv eller PCR-negativ kan endast vara falsk under f?ruts?ttning att laboratoriepersonalen inte har en h?g professionalism. Om det borttagna biomaterialet var f?rorenat eller f?rvarats felaktigt, kan avkodningen av PCR-analysen ha f?rvr?ngda resultat.

F?rberedelse f?r diagnostik

Ett PCR-utstryk p? kvinnor tas fr?n livmoderhalsen om det ?r n?dv?ndigt f?r att identifiera sexuellt ?verf?rbara sjukdomar, till exempel klamydia, ureaplasma eller herpes. Om PCR kr?vs f?r att utf?ras p? dessa bakterier av en man, s? tas en flytning fr?n urinr?ret fr?n honom - prostatajuice, med andra ord. Blod unders?ks med PCR om de vill fastst?lla hepatit, toxoplasmos och HIV. En PCR-analys g?rs f?r mononukleos och cytomegalovirus genom att ta bort en pinne fr?n halsen. Polymeraskedjereaktion f?r n?rvaron av lunginfektioner utf?rs med n?rvaron av ett biomaterial s?som sputum eller pleurav?tska.

PCR under graviditeten g?rs om det finns misstanke om intrauterina infektioner, liksom sjukdomar och patologier i fostrets nervsystem. Som biomaterial f?r forskning tas placentav?vnad fr?n gravid v?vnad. Om en person har en skada p? nervsystemet unders?ks cerebrospinalv?tskan. F?r att best?mma en s?dan bakterie som Helicobacter pylori anv?nds biopsier av magen och tolvfingertarmen.

Urinanalys PCR anv?nds ocks? ofta, men det ?r mindre f?redraget ?n ett blodprov. Det l?ter dig se n?rvaron av patogena mikroorganismer som provocerar infektionssjukdomar, men kan inte indikera deras exakta antal och graden av utveckling av sjukdomen. Urin PCR anv?nds om det av n?gon anledning inte g?r att ta ut blod eller g?ra ett utstryk. Det b?r ocks? noteras att urin-PCR kan anv?ndas f?r att unders?ka infektioner hos sm? barn. Urinanalys l?ter dig ocks? best?mma n?rvaron av infektion och inflammation i urinbl?san, best?mma stenar, sand samt cystit och uretrit.

Som n?mnts ovan kan du ta en analys f?r PCR i n?rvaro av vilket biomaterial som helst. PCR-analys, vad det ?r, du vet, du m?ste ocks? veta hur man f?rbereder sig f?r diagnos. F?rberedelserna beror direkt p? vad som ska tas ut, till exempel m?ste du kissa efter noggrann hygien av k?nsorganen p? morgonen. Blod doneras p? fastande mage, under donationen, eller snarare dagen innan, ?r det n?dv?ndigt att ?verge anv?ndningen av n?gra mediciner. Om det finns kroniska ?kommor, best?ms listan ?ver godk?nda l?kemedel f?r anv?ndning individuellt av den behandlande l?karen.

Fekal analys tas p? morgonen efter noggrann f?rberedelse. P? tr?skeln till leverans ?r det n?dv?ndigt att v?gra tung mat och genomf?ra noggrann hygien av k?nsorganen. Fekal analys kommer att vara op?litlig om biomaterialet togs bort med lavemang, en naturlig nedstigning av materialet ?r n?dv?ndig. F?rberedelse f?r leverans av saliv kr?vs inte, det r?cker att sluta r?ka, dricka citrusjuice.

Innan de l?mnar in biomaterial f?r best?mning av sjukdomar som ?verf?rs under sex, m?ste patienterna utesluta sexuell kontakt tv? dagar f?re PCR-diagnostik. Det ?r f?rbjudet f?r kvinnor att ta ett utstryk fr?n livmoderhalsen under kritiska dagar tv? dagar efter menstruationen, annars kommer PCR-avkodningen att ha f?rvr?ngd information.

Screeningsresultat

Det ?r bara en kvalificerad l?kare som kan f?rklara i detalj vad en s?dan PCR-analys s?ger om tillst?ndet hos en viss patient, det kommer inte att vara l?tt att f?rst? de uppgifter som anges i formul?ret p? egen hand. Om du ber l?karen att dechiffrera uppgifterna kommer han f?rst och fr?mst att s?ga om resultatet ?r positivt eller negativt. Om analysen ?r negativ ?r personen frisk och inga bakterier hittades i testmaterialet. I fallet med ett positivt resultat anges den exakta typen av patogen och dess kvantitet, du kan ocks? ta reda p? den exakta perioden d? infektionen var genom n?rvaron av vissa immunglobuliner.

Det finns flera klasser av immunglobuliner som tydligt kan ?terspegla patientens tillst?nd:

1. IgG utvecklas i blodet efter 4 veckors infektion och kan kvarst? i blodet i upp till flera ?r. De ?r inte alltid indikatorer p? bakterier, ibland fungerar de som ett minne av kroppen att den en g?ng st?tt p? en liknande typ av patogen.
2. IgM - visas i b?rjan efter infektion. Som regel ?r de redan synliga p? den 5: e dagen, dessa ?r de f?rsta f?rsvararna av kroppen som attackerar bakterien. De f?rsvinner fr?n blodresultatet efter tv? veckor. Om de ?r n?rvarande i blodprovet, kan det antas att infektionen intr?ffade ganska nyligen, f?r ungef?r en vecka sedan.
3. IgA signalerar den akuta utvecklingen av en bakteriell infektion i kroppen eller det ?terkommande stadiet av en kronisk sjukdom.

Det finns ett antal fall d? analysen visar ett positivt resultat, men personen m?r inte alls d?ligt. Detta indikerar inte alls ett fel i diagnosen, snarare finns det en kronisk form av sjukdomen, som ?r i ett vilande tillst?nd, eller s? har utvecklingen av sjukdomen precis b?rjat. F?r n?rvarande finns det inte tillr?ckligt med bakterier som kan provocera fram symtom.

Nu k?nner du till analysprincipen, och du kan ans?ka om denna diagnos om det finns minsta misstanke om en infektionssjukdom. Varaktigheten av ytterligare behandling och dess effektivitet beror direkt p? hur snabbt du klarar diagnosen, som ?r praktiskt taget sm?rtfri. F?r att st?ndigt bibeh?lla din h?lsa p? en bra niv?, rekommenderas att genomg? f?rebyggande PCR-diagnostik en g?ng om ?ret f?r f?rekomst av STD, samt infektioner i andra organ. Det ?r b?ttre att f?rebygga sjukdomen ?n att ta itu med dess konsekvenser senare.

I de flesta fall m?ste patienterna hantera en situation d?r PCR-diagnostik kr?vs f?r att unders?ka eller fastst?lla sjukdomen. Det ?r viktigt att f?rst? vad det ?r och varf?r det beh?vs.

Metoden med polymeraskedjereaktion (PCR) ?r en studie som hj?lper till att identifiera m?nga sjukdomar i de inledande stadierna av utvecklingen. Dess essens ligger i att hitta DNA eller RNA fr?n en patogen som finns i kroppen. PCR l?ter dig best?mma patogenen i fall d?r andra typer av forskning ?r ineffektiva.

Populariteten f?r denna metod ligger i dess enkelhet och anv?ndningsbredd. Det anv?nds av l?kare f?r att diagnostisera olika sjukdomar. G?r att du snabbt kan utf?ra komplexa kvantitativa och genomiska studier.

En av de viktigaste medicinska till?mpningarna av den klassiska PCR-metoden ?r detektering av mikroorganismer som kan orsaka patologiska tillst?nd.

K?rnan i PCR-analys

PCR-diagnostik (som f?rklaras av molekyl?rbiologi) ?r en molekyl?r kloningsteknik som anv?nds f?r att analysera en kort sekvens av DNA som finns n?rvarande i minimala m?ngder i prover som inneh?ller n?got genetiskt material. Denna metod kallas ofta f?r "DNA-kopiatorn".

PCR-diagnostik utf?rs in vitro (utanf?r kroppen) i laboratoriet och baseras p? den naturliga processen med DNA-duplicering innan dess delning. F?rutom att kunna uppt?cka ett virus, en bakterie eller annan mikroorganism i ett prov, g?r PCR det m?jligt att identifiera deras antal.

Vid sjukdomar som hepatit C eller humant immunbristvirus (HIV)-infektion ?r virusm?ngden en bra indikator p? var sjukdomen finns och hur effektiv terapi ?r.

Bev?pnad med denna information kan l?kare best?mma n?r behandlingen ska p?b?rjas och kontrollera processen. Detta g?r att du kan skapa ett individuellt tillv?gag?ngss?tt f?r varje patient.

PCR-diagnostik inkluderar tre steg, i var och en av vilka m?ngden m?l-DNA ?kar markant. Som ett resultat av en s?dan reaktion erh?lls mer ?n en miljard kopior av original- eller "m?l"-DNA, vilket g?r det m?jligt att bed?ma f?rekomsten av viruset i kroppen. Detta ?r huvudegenskapen hos PCR-metoden.

F?rdelar och nackdelar med metoden

PCR-diagnostik (vad det ?r, beskrivet ovan) beskrevs i detalj av Keri Mullis 1983. Sedan dess har metoden varit mycket popul?r i laboratoriepraktiken.

De fr?msta f?rdelarna med denna typ av forskning ?r:

• universalitet;
• hastighet av resultat;
• h?g sannolikhet att erh?lla tillf?rlitliga resultat;
• specificitet;
• olika sjukdomar som kan identifieras.

Universaliteten hos PCR-metoden ligger i m?jligheten att anv?nda alla m?nskliga fysiologiska material. ?ven ett h?rstr? r?cker f?r analys.

Databehandlingsprocessen, tack vare automatisering, kan ta flera timmar. Specificitet best?r i att isolera ett specifikt DNA-fragment som ?r karakteristiskt f?r en viss patogen. Med hj?lp av PCR-analys kan m?nga sjukdomar diagnostiseras, b?de i det akuta skedet och i det latenta skedet.

Men trots det stora antalet f?rdelar har PCR-diagnostikmetoden ocks? nackdelar:

• sannolikheten f?r falskt positiva resultat;
• h?g k?nslighet;
• mikroorganismernas variation.

Den st?rsta nackdelen med metoden ?r of?rm?gan hos PCR att skilja levande mikroorganismer fr?n d?da.. Det avser i regel en situation d?r behandlingens framg?ng ska bed?mas. I det h?r fallet, om sjukdomen har behandlats, f?rblir de d?da cellerna i m?nniskokroppen under en tid, och det tar lite tid fr?n 4 till 6 veckor att helt f?rnya den.

H?gk?nslighet ?r en f?rdel och samtidigt en nackdel. Vissa mikroorganismer finns i sm? m?ngder i kroppen. D?rf?r, i det h?r fallet, ?r denna diagnostiska metod inte informativ, och det rekommenderas att anv?nda andra typer av forskning.

Vilken mikroorganism som helst kan mutera. Och ?ven om amplifieringsprocessen anv?nder ett specifikt fragment som ?r minst mottagligt f?r f?r?ndringar, kan det fortfarande f?rv?rva mutationer och bli osynligt f?r testsystemet. Denna situation f?rklarar det faktum att olika system f?r laboratorieanalyser kan visa helt olika resultat.

Inom vilka omr?den anv?nds metoden?

PCR-studien kan anv?ndas i klinisk praxis f?r att identifiera olika sjukdomar. Det anv?nds ofta inom gynekologi, urologi, gastroenterologi, onkologi, etc. Dessutom anv?nds det effektivt inom kriminalteknik f?r att fastst?lla identitet och faderskap.

Denna typ av studier anv?nds i planeringsstadiet och under graviditeten. En analys f?r TORCH-infektion utf?rs f?r att identifiera f?rekomsten av en infektion i en kvinnas kropp. Sjukdomar orsakade av en av infektionerna kan vara milda f?r en kvinna, men orsaka allvarliga fosterskador fram till hans d?d.

Den diagnostiska PCR-metoden hj?lper ocks? till att best?mma en persons genetiska predisposition f?r utvecklingen av vissa sjukdomar i framtiden.

Vilka infektioner som uppt?cks av PCR-diagnostik

PCR-metoden hj?lper till att identifiera virus, bakterier och svampar.

De vanligaste sjukdomarna som kan diagnostiseras med det:

Vilka biologiska material som studeras

Med tanke p? sjukdomen, symtomen och syftena med studien kan PCR-diagnostik anv?nda vilken fysiologisk v?tska eller v?vnad som helst.

Det kan vara:

• blod;
• saliv;
• sputum;
• urin;
• exkret;
• utstryk fr?n orofarynx;
• en bit av angripen v?vnad;
• ledv?tska;
• skrapning fr?n slidan hos kvinnor eller fr?n urinr?ret hos m?n;
• ejakulat;
• h?r och andra.

F?r sjukdomar i det genitourin?ra systemet tas urin, ett utstryk fr?n slidan hos kvinnor eller fr?n urinr?ret hos m?n. Ven?st blod doneras f?r att diagnostisera sjukdomar som HIV, hepatit av olika slag, TORCH-infektioner.

F?r att utesluta eller bekr?fta onkologi, under kirurgiska ingrepp, avl?gsnas bitar av v?vnad f?r en biopsi.

Hur man f?rbereder sig f?r analys

F?rberedelserna f?r studien beror p? vilket biomaterial som l?mnas in. Man b?r ocks? komma ih?g att det ?r n?dv?ndigt att utesluta anv?ndningen av antibiotika och andra mediciner. F?r att ?vervaka behandlingens effektivitet b?r du h?lla ett intervall efter att ha tagit l?kemedlen i minst 4 veckor.

Blod ges p? morgonen p? fastande mage. Urin och avf?ring m?ste placeras i en absolut steril beh?llare avsedd f?r detta. Samtidigt, innan du samlar urin, ?r det n?dv?ndigt att utf?ra hygien av de yttre k?nsorganen.

Om ett utstryk ges m?ste du:

• kissa inte p? 3 timmar;
• det rekommenderas inte att tv?tta och duscha dagen innan (f?r kvinnor);
• en dag f?r att stoppa sexuell aktivitet;
• kvinnor b?r ta ett utstryk i mitten av cykeln.

Stadier av PCR-forskning

Innan PCR p?b?rjas m?ste DNA isoleras fr?n provet. DNA-isolering ?r en process i flera steg som kan utf?ras manuellt eller instrumentellt.

Efter provberedning b?rjar PCR-processen i tre steg:

• separation av m?l-DNA (denaturering);
• amplifiering (multiplikation) av DNA-fragment;
• detektion (identifiering) av amplifierade DNA-fragment.

Det f?rsta steget av PCR kallas denaturering. Dess v?sen ligger i det faktum att ett provr?r med DNA-prover v?rms upp till h?ga temperaturer (cirka 90 grader). P? grund av h?ga temperaturer f?rst?rs svaga bindningar mellan nukleotiderna som bildar molekylernas kod. Som ett resultat separeras dubbelstr?ngat DNA eller RNA i tv? separata str?ngar.

F?r studiens "renhet" tills?tts en speciell l?sning till biomaterialet som studeras, som l?ser upp organiska ?mnen. Varaktigheten av detta steg beror p? typen av testmaterial och smitt?mnet.

PCR-diagnostik (vad det ?r, beskrivet ovan) i det andra steget multiplicerar DNA-fragment baserat p? DNA fr?n sj?lva infektionen. PCR kopierar inte all nukleinsyra i ett prov. Den kopierar bara en speciell sekvens av den genetiska koden, ett kort fragment (primer).

I det andra steget kyls r?ret. Hela PCR-processen automatiseras av en maskin som kallas termostat eller cykler och kan slutf?ras inom n?gra timmar. PCR-maskinen ?r programmerad att ?ndra temperaturen p? reaktionsblandningen med n?gra minuter. Detta sker s? att korta fragment kan binda till den enkelstr?ngade mallen.

Amplifiering sker i 30-40 cykler. Under denna period kopierar laboratorieassistenten DNA-fragmentet och ?kar dess m?ngd genom en kedjereaktion. F?r varje cykel ?kar allts? antalet kopior till flera miljoner eller till och med miljarder.

I den tredje fasen av studien detekteras n?rvaron av DNA fr?n virus och bakterier. Detta g?rs genom att f?rdela den resulterande blandningen och l?gga till en speciell l?sning till den. Denna v?tska till?ter DNA-fragment att f? en viss f?rg under p?verkan av ultravioletta str?lar. Detta ?r en indikator p? att patogena mikrober finns i m?nniskokroppen.

PCR under graviditeten

PCR-diagnostik (vad det ?r, beskrivet ovan) kan ordineras f?r f?rsta g?ngen under graviditeten, eftersom det ?r ett obligatoriskt f?rfarande. Denna metod hj?lper till att identifiera dolda infektioner och hotet om missbildningar hos fostret.

F?r analysanv?ndning:

Det finns sjukdomar av smittsam natur som negativt kan p?verka fostrets utveckling, orsaka defekter, orsaka f?r tidig f?dsel och missfall. De ?r s?rskilt farliga under graviditetens f?rsta trimester och ?r i de flesta fall en medicinsk indikation f?r abort. Dessa infektioner kallas gemensamt f?r TORCH-komplexet.

PCR-analys hj?lper till att fastst?lla n?rvaron eller fr?nvaron av infektion i en gravid kvinnas kropp. Det utf?rs ofta under graviditetsplaneringen eller under f?rsta trimestern. Vid positivt resultat kr?vs ett nytt test. Och f?rst efter bekr?ftelse av resultaten f?reskrivs l?mplig behandling.

PCR f?r HIV-diagnos

PCR-metoden f?r att diagnostisera HIV-infektion ?r ett dyrt test och anv?nds f?r speciella indikationer. Dessa inkluderar donation, och det kan ocks? f?rskrivas till patienter som skadats i en bilolycka med personer med hiv.

PCR hj?lper till att identifiera f?rekomsten av infektion i de tidiga stadierna innan kroppen utvecklar antikroppar mot HIV. Resultatet med en h?g procentandel av sannolikhet kan studien visa redan 5-14 dagar efter virusets penetration.

I andra fall hj?lper n?rvaron av ett virus i m?nniskokroppen till att etablera en enzymkopplad immunosorbentanalys (ELISA). Den uppt?cker antikroppar mot HIV i en persons blod, som b?rjar produceras 1-3 m?nader efter infektion. Kvantitativ best?mning av analysen av mikroorganismer ?r n?dv?ndig f?r att kontrollera behandlingen av patienter.

PCR f?r diagnos av hepatit

Viral hepatit C ?r en allvarlig sjukdom som kan leda till utveckling av levercirros. Under inkubationstiden, som kan vara upp till 12 m?nader, visar sig viruset inte p? n?got s?tt, patienten ?r praktiskt taget inte smittsam och viruset kan inte uppt?ckas med ett rutinm?ssigt blodprov.

Oftast, med tidig behandling, blir sjukdomen kronisk och hotar med flera komplikationer.

Vid infektering av hepatit B ?r inkubationstiden inte s? l?ng och de f?rsta symtomen kan observeras efter 4 veckor. Det ?r under denna period som ELISA kan visa n?rvaron av viruset i kroppen.

PCR-metoden till?ter:

• identifiera sjukdomen i inkubationsstadiet;
• l?sa tvivelaktiga analyser av andra studier;
• utv?rdera effektiviteten av antiviral terapi.

Fr?nvaron av hepatit-DNA-virus efter behandling ?r ett tecken p? dess effektivitet.

Tuberkulostest

Utvecklingen av tuberkulos provoceras av Kochs bacill, som kan komma in i m?nniskokroppen av luftburna droppar. Sjukdomen har tv? former: latent och ?ppen. I det f?rsta fallet ?r den infekterade personen inte b?rare av infektionen och mykobakterier i sputum uppt?cks inte ens med PCR. Denna form har fortfarande en fara, eftersom den kan flytta in i en ?ppen scen.

Det ?ppna (aktiva) stadiet utg?r en fara f?r andra, ?ven vid strikt efterlevnad av reglerna f?r personlig hygien. F?r att diagnostisera sjukdomen anv?nds fluorografi, tomografi och lungr?ntgen. ?ven f?r detta ?ndam?l anv?nds ett hudtuberkulerat test (Mantoux-test). Men den mest effektiva forskningsmetoden ?r PCR.

F?ljande prover anv?nds som testprover:

• blod;
• sputum;
• bronkialv?tska.

PCR f?r HPV-diagnos

Diagnos f?r HPV utf?rs vid symtom p? sjukdomen, s?som papillom och v?rtor i underlivet. Studien f?reskrivs ocks? i stadiet av graviditetsplanering, i fall av infertilitet, missfall, s?v?l som vid infektion av en av partnerna, eftersom en av mekanismerna f?r ?verf?ring av viruset ?r sexuell.

Det farligaste ?r inte sj?lva n?rvaron av viruset i kroppen, utan dess typ. Vissa av dess arter (16 och 18) ?r mycket onkogena och kan orsaka livmoderhalscancer hos kvinnor. PCR-metoden kan f?rskrivas i samband med andra typer av forskning. F?r analys anv?nds oftast ett utstryk fr?n k?nsorganen. Blod, urin och flytningar fr?n slidan anv?nds s?llan som biomaterial.

Med herpes

Detta test diagnostiserar genital infektion med herpes simplex virus typ 1 och 2 (HSV1/HSV2). Om du ?r positiv f?r HSV2 b?r du testas f?r hiv och andra k?nssjukdomar. Analysen kr?ver patientens ven?sa blod.
Urin, flytningar och inneh?llet i utslagen kan ocks? unders?kas om symtom finns.

Omfattande PCR-unders?kning

Om det finns indikationer eller i syfte att f?rebygga sjukdomar kan en upps?ttning tester med PCR ordineras. Oftast ?r initiativtagaren patienten sj?lv, det finns fall n?r en omfattande unders?kning f?reskrivs f?r att f?rhindra utbrott av vissa sjukdomar i en viss region.

PCR-12 ?r en omfattande studie som t?cker f?ljande infektioner:

1. Hepatit.
2. Herpes.
3. STD.
4. Tuberkulos.
5. Encefalit.
6. Candidiasis.
7. Helicobacter infektion.
8. Cytomegalovirus.
9. Mononukleos.
10. Onkovirus.
11. Listerios.

Dechiffrera PCR-analysen

Efter analysen med PCR kan ett positivt eller negativt resultat meddelas.

Noggrannhet i PCR-diagnostik

I de flesta fall ger PCR-diagnostik mycket exakta resultat. Men i vissa fall kr?vs ytterligare forskningsmetoder f?r att bekr?fta diagnosens riktighet.

Vad kan orsaka ett falskt resultat?

Falska positiva resultat kan bli resultatet av att reglerna f?r insamling av analyser och sj?lva forskningsf?rfarandet inte f?ljs.

Patienten sj?lv kan vara boven till falsk information vid otillr?cklig f?rberedelse f?r leverans av biomaterial. Laboratoriets utrustning och l?karens professionalism kan direkt p?verka resultaten av studien.

Var kan man f? PCR-diagnostik

PCR-diagnostik utf?rs p? privata kliniker och laboratorier p? l?kares order eller p? patientens initiativ i f?rebyggande syfte.
F?retr?de b?r ges till kliniker och laboratorier med modern utrustning som har funnits p? den medicinska marknaden i flera ?r och har bevisat sig sj?lva.

PCR-analys: kostnad och tidpunkt

Denna diagnostiska metod ?r dyr. Dess pris varierar fr?n 200 till 500 rubel f?r varje typ. En omfattande unders?kning av f?rekomsten av flera infektioner g?r att du kan spara avsev?rt j?mf?rt med att betala f?r varje enskild studie.

Studiens varaktighet beror p? typen av infektion och kan ta fr?n 1 till 5 dagar. Dessa indikatorer beror ocks? p? laboratoriets utrustning och den medicinska arbetarens kvalifikationer.

PCR-diagnostik (vad det ?r beskrivs i detalj i den h?r artikeln) ?r den mest exakta och snabbaste forskningsmetoden. Det ?r en av de viktigaste uppt?ckterna p? 1900-talet. i medicin.

Tack vare denna metod blev ett fullst?ndigt botemedel f?r m?nga sjukdomar m?jligt. Men gl?m inte att PCR har vissa nackdelar, och dess effektivitet ?kar ibland i samband med anv?ndningen av andra forskningsmetoder.

Artikelformatering: Vladimir den store

Video om PCR-diagnostik

Om PCR-noggrannhet: